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PCR(聚合酶鏈式反應)實驗室通常需要以下幾類儀器設備及耗材:
一、儀器設備
1、PCR 擴增儀:這是核心設備,能夠按照設定的程序對樣本中的特定片段進行快速、大量的擴增,以滿足后續檢測分析需求。
2、核酸提取儀:用于從各種生物樣本(如血液、組織、拭子等)中提取出核酸(DNA 或 RNA),方便后續的 PCR 反應。
3、生物安全柜:可保護實驗人員、樣本以及環境,避免在操作過程中發生樣本氣溶膠等有害物質的擴散,尤其是在處理具有潛在感染性的樣本時十分關鍵。
4、離心機:用于對樣本進行離心處理,比如將血液樣本進行離心分層,以便獲取血細胞等用于核酸提取的部分,有不同轉速規格可供選擇,以適應不同類型樣本的離心需求。
5、移液器:精確量取不同體積的液體試劑,如提取試劑、反應緩沖液、引物等,常見的有單通道和多通道移液器,可根據實際操作情況選用。
6、超凈工作臺:提供局部的無菌操作環境,利于試劑配制等操作,保證實驗過程不受外界微生物等污染。
7、冰箱:包括普通冷藏冰箱(用于存放一些酶、緩沖液等需要低溫保存但不需要過低溫度的試劑)和超低溫冰箱(用于長期保存核酸樣本、珍貴的引物等對溫度要求苛刻的物品)。
8、恒溫金屬浴:可對裝有樣本或試劑的離心管等進行恒溫加熱,便于進行核酸變性、酶反應等需要精確溫度控制的步驟。
9、凝膠成像系統:在進行瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增產物后,用于觀察和拍攝電泳條帶,分析擴增結果的準確性、片段大小等情況。
10、電泳儀:配合瓊脂糖凝膠電泳,為核酸在凝膠中的遷移提供穩定的電場,使不同大小的核酸片段能依據其分子量大小在凝膠中分離,進而輔助判斷 PCR 擴增產物情況。
二、耗材
1、PCR 反應管:是進行 PCR 反應的容器,一般為薄壁管,利于熱量傳遞,確保反應過程中各管內溫度均勻一致,且有不同規格,常見的為 0.2ml、0.5ml 等。
2、槍頭:與移液器配套使用,有不同量程規格對應的槍頭,如 10μl、200μl、1000μl 等,需要保證槍頭的無菌和無核酸酶污染,確保量取液體的準確性和樣本不受污染。
3、離心管:用于樣本的離心、試劑的分裝等,材質多樣,常用的有塑料材質的,有不同規格,例如 1.5ml、5ml 等,有的還帶有螺旋蓋等便于密封保存。
4、一次性手套:實驗人員操作時佩戴,防止手上的汗液、皮屑等污染樣本和試劑,同時也保護自身免受潛在有害樣本的侵害,通常選用無粉、耐化學腐蝕的手套。
5、口罩:減少實驗人員呼出的氣體等對實驗環境和樣本的影響,維持相對潔凈的操作空間。
6、防護服:在處理一些有感染風險的樣本或者對實驗環境要求較高的情況下穿著,避免衣物上的灰塵等雜質帶入實驗室以及防止樣本接觸到人體。
7、核酸提取試劑盒:包含了從樣本中提取核酸所需的各種試劑,不同樣本類型(如病毒、細菌、細胞等)可能需要使用相應適配的試劑盒。
8、PCR 反應試劑盒:內有進行 PCR 反應所需要的試劑,像 DNA 聚合酶、dNTP、反應緩沖液以及引物等成分,有的是通用型,有的則是針對特定檢測目標設計的專用試劑盒。
9、瓊脂糖:用于配制瓊脂糖凝膠,作為電泳時核酸分離的介質,通過不同濃度的瓊脂糖凝膠可以實現對不同大小范圍核酸片段的有效分離。
10、電泳緩沖液:如常用的 TAE、TBE 緩沖液,為核酸在凝膠中的電泳遷移提供穩定的離子環境,保證電泳過程能正常進行。
不同用途和規模的 PCR 實驗室在具體的儀器設備和耗材選擇上可能會有所側重和差異,但總體上都圍繞保障核酸提取、PCR 擴增以及結果檢測分析等環節的順利開展來配備。