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在賽默飛QuantStudio 5實時熒光定量PCR實驗中,完成當前步驟后,下一步取決于你實驗的具體階段。以下是常見實驗流程及下一步操作建議:
一、已完成QuantStudio 5 PCR反應體系配制
1、將反應板/管放入QuantStudio 5儀器中,確保正確對齊。
2、在軟件(QuantStudio Design & Analysis Software)中設置實驗參數(如循環條件、熒光通道等)。
3、點擊“運行實驗"開始PCR擴增和數據采集。
二、QuantStudio 5 PCR運行已完成
1、數據分析:
檢查擴增曲線(S形曲線是否正常)。
計算Ct值(用于定量分析)。
若使用SYBR Green,進行熔解曲線分析(檢查擴增特異性)。
2、數據導出:
將結果保存為Excel、PDF或RDML格式(符合MIQE指南)。
三、數據分析已完成
儀器維護:
清潔反應模塊(用無水乙醇擦拭孔位)。
檢查光學系統是否污染(必要時校準)。
定期(每3-6個月)進行溫控校準。
四、實驗出現異常
1、排查問題:
檢查熒光信號是否正常(可能需清潔光學模塊)。
確認溫度準確性(必要時校準)。
檢查試劑是否降解或污染。
2、聯系技術支持(如賽默飛售后服務)
五、長期維護建議
1、定期更新軟件版本。
2、每1-2年由專業工程師進行全面檢修。